一. 背景

洋蔥伯克霍爾德菌，拉丁名：Burkholderia cepacia (B. cepacia)，原屬假單胞菌屬（Pseudomonas cepacia），是植物病原菌，因引起植物患病而得名，1971年首次有引起人類(lèi)感染的報道。是囊性纖維化（CF）患者和慢性肉芽腫性病患者的條件致病菌。
 

參照PDA TR67中:“表2：與產(chǎn)品召回、非無(wú)菌制劑引起的感染及臨床感染相關(guān)的常見(jiàn)微生物種類(lèi)”，與洋蔥伯克霍爾德菌有關(guān)的產(chǎn)品召回事件在所有召回事件中（N=144）占據首位（出現34 次），也占據著(zhù)大眾視野。該菌已經(jīng)被美國FDA列為不可接受微生物。



二. 生長(cháng)特性

（1） 洋蔥伯克霍爾德菌為需氧非發(fā)酵菌，最適生長(cháng)溫度為30-35℃；革蘭氏染色，在顯微鏡下觀(guān)察，為革蘭氏陰性無(wú)芽孢桿菌；

（2） 氧化酶試驗：遲緩性氧化酶陽(yáng)性（紫紅色、紫色或者深藍色），反應時(shí)間為2-10min；

（3） 過(guò)氧化氫酶試驗：洋蔥伯克霍爾德菌為遲緩產(chǎn)氣，1s后緩慢出現氣泡；

（4） 蔗糖氧化陽(yáng)性；枸櫞酸鹽利用試驗陽(yáng)性；七葉苷利用陽(yáng)性；

（5） 在藥品檢驗用非選擇性培養基中（TSA/TSB/SDA/SDB/NA/NB/R2A）能夠生長(cháng)良好,在選擇性培養基麥康凱液體（MACB）、麥康凱瓊脂(MACA)和紫紅膽鹽瓊脂培養基（VRBGA）中能夠生長(cháng)良好。在CA上25℃培緩慢生長(cháng)。EE里緩慢生長(cháng)，RVS和XLD不支持該菌生長(cháng)。


三. 相關(guān)檢測標準

 

（1）《SN/T 4684-2016 進(jìn)出口化妝品中洋蔥伯克霍爾德菌檢驗方法》

     該標準規定了進(jìn)出口化妝品檢驗洋蔥伯克霍爾德菌方法為：分別用含多粘菌素B的SCDLP增菌液和含慶大霉素的BCSA增菌液依次進(jìn)行增菌培養，再分別在BCSA瓊脂（含多粘菌素B和慶大霉素）和麥康凱瓊脂（含多粘菌素B和慶大霉素）平板上進(jìn)行分離培養；最后對疑似菌落進(jìn)行鑒定。

 

（2）《SN/T 4485-2016 進(jìn)出口口腔清潔類(lèi)產(chǎn)品中洋蔥伯克霍爾德菌檢驗方法》

該標準規定了進(jìn)出口口腔清潔類(lèi)產(chǎn)品中檢驗洋蔥伯克霍爾德菌方法為：通過(guò)改良LETHEEN氏肉湯增菌培養，再劃線(xiàn)接種在洋蔥伯克霍爾德菌瓊脂上進(jìn)行分離培養，最后對疑似菌進(jìn)行鑒定。

 

（3）USP42<60> MICROBIOLOGICAL EXAMINATION OF NONSTERILE PRODUCTS—TESTS FOR BURKHOLDERIA CEPACIA COMPLEX 

USP42<60>規定了使用TSB對樣品進(jìn)行預培養，在BCSA上劃線(xiàn)選擇性培養。洋蔥伯克霍爾德菌可能存在的指示特征為周?chē)S色的綠棕色菌落，或者周?chē)奂t色的白色菌落。挑選可疑菌進(jìn)行鑒定。


四. 關(guān)于BCSA培養基（USP）

     
      其中酪胨和酵母提取物提供豐富的氮源，乳糖和蔗糖提供兩種碳源，酚紅指示劑，結晶紫、萬(wàn)古霉素抑制革蘭氏陽(yáng)性菌的生長(cháng)，慶大霉素抑制部分革蘭氏陰性菌的生長(cháng)，多粘菌素B可抑制銅綠假單胞菌、肺炎克雷伯菌、鮑曼不動(dòng)桿菌等菌的生長(cháng)。

     目前，北京三藥針對洋蔥伯克霍爾德菌的檢驗開(kāi)發(fā)了兩種培養基，洋蔥伯克霍爾德菌選擇性瓊脂基礎（符合USP）和BCC培養基基礎以及對應的配套試劑。




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